Evaluación de la microvibración en células óseas en la síntesis de citocinas pro-inflamatorias

Abstract

The micro-vibration applied in mature osteoblastic and osteoclastic cells accelerates the effect of bone remodeling, through the stimulation of the cytokines IL-1, TNF-ɑ, RANKL. Aim: To determine the effects of the micro-vibration of osteoblastic and osteoclastic cells on the synthesis of IL-1, TNF-ɑ, and RANKL. Materials and methods: Osteoblasts were obtained from new born mouse skulls (2 weeks) and osteoclasts were derivate from the bone marrow of the tibiae of the Balb/c strain, which were placed and seeded in a plate of 24-wells and were cultured respectively, D-MEM-F12 media for osteoblasts and ɑ-MEM for osteoclasts. Both culture media were supplemented with 10% fetal serum, antibiotics and 1% antimycotics and were incubated in an environment of 5% of CO2 and 95% air at a temperature of 37o.C. The 24-well Petri dish was subjected to micro-vibration with the Acceledent® device for 20 minutes at 0.25 N, 30 Hz. The supernatant was collected before and after of the stimulation, stored in an ultra-freezer at -70 °C. To further assess the expression of IL-1β, TNF- ɑ, RANKL by ELISAs’ assay. Results: a significant down-regulation of the production of RANKL in osteoblasts and osteoclasts (P< 0.001) and up-regulation of TNF-ɑ (P <0.001) and IL-1 (P: 0.001). Conclusions: The Micro-vibration with the Acceldent Aura appliance inhibits the osteoclast in culture, which allows soluble factors for bone remodeling

La micro-vibración aplicada en las células osteoblásticas y osteoclásticas maduras acelera el proceso de remodelación ósea por medio de la estimulación de citocinas. Objetivo: determinar los efectos de micro vibración de las células osteoblásticas y osteoclásticas de las síntesis de IL-1, TNF-&#593;, RANKL. Materiales y métodos: Los osteoblastos fueron obtenidos de los cráneos de ratones recién nacidos (2 semanas) y los osteoclastos fueron derivados de la médula ósea de la tibia de la cepa Balb/c, colocados y sembrados en un placa de 24 pozos y cultivadas en un medio de D-MEM-F12 para osteoblastos y &#593;-MEM para osteoclastos respectivamente. Ambos medios de cultivo fueron suplementados con 10% de suero fetal, antibióticos y 1% de antimicóticos, y fueron incubados en un ambiente del 5% de dióxido de carbono y 95% de aire a temperatura a 37°C. La caja petri de 24 pozos fue sometida a micro-vibraciones de 0.25 N, 30 Hz con el aparato de Acceledent durante 20 minutos. El sobrenadante fue recolectado antes y después de la estimulación, guardado en un ultra congelador de -70 °C, para después realizar el ensayo de la expresión de IL-1, TNF-&#593;, RANKL. La micro-vibración con el aparato de acceledent aura inhibe a los osteoclastos en cultivos in vitro, la cual permite a los factores solubles para la remodelación ósea.