Obtención e identificación de proteínas de actinomadura madurae

Abstract

El presente informe describe la obtención y caracterización del perfil proteico de Actinomadura madurae, bacteria filamentosa responsable del actinomicetoma, una enfermedad infecciosa crónica y desatendida que afecta principalmente a poblaciones de regiones tropicales y subtropicales. Este padecimiento presenta relevancia clínica y epidemiológica debido a su progresión destructiva, dificultades diagnósticas y alto impacto socioeconómico. El estudio tuvo como objetivo principal obtener, purificar y analizar proteínas del extracto total de Actinomadura madurae, con el propósito de generar información base para futuras aplicaciones en diagnóstico y comprensión de la patogénesis. Para ello, se empleó un diseño experimental de laboratorio utilizando una cepa de referencia cultivada en condiciones controladas. La biomasa bacteriana fue sometida a procesos de lisis por sonicación, precipitación con sulfato de amonio y diálisis, obteniendo un extracto proteico adecuado para análisis posteriores. La cuantificación de proteínas mediante el método de Lowry evidenció una concentración de 2.5 mg/mL, confirmando la calidad del extracto para estudios electroforéticos. El análisis por SDS-PAGE reveló un perfil proteico complejo, con múltiples bandas distribuidas entre 10 y 250 kDa, destacando regiones de mayor intensidad en 60–65 kDa y 45–50 kDa, asociadas posiblemente a proteínas estructurales, enzimas metabólicas y chaperonas como GroEL. Los resultados obtenidos concuerdan con reportes previos en actinomicetos, sugiriendo una diversidad funcional de proteínas implicadas en procesos de virulencia e interacción hospedero–patógeno. Asimismo, se identifican proteínas potencialmente relacionadas con la activación de la respuesta inmune, lo que resalta su importancia en el desarrollo de herramientas diagnósticas más específicas. En conclusión, este trabajo proporciona un primer acercamiento al perfil proteico de Actinomadura madurae, estableciendo una base sólida para investigaciones futuras orientadas a la identificación específica de proteínas mediante técnicas avanzadas como espectrometría de masas, así como al diseño de estrategias diagnósticas y terapéuticas más efectivas.