Estandarización de una prueba diagnóstica con el método de ensayo basado en células para el diagnóstico de Enfermedad Desmielinizante mediada por anticuerpos anti-MOG

Abstract

Myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody-associated disease (MOGAD) has recently been defined by several international panels as a distinct entity from other demyelinating diseases. However, it remains an emerging and challenging clinical problem due to the overlap in symptoms with multiple sclerosis (MS) and neuromyelitis optica spectrum disorder (NMOSD). Therefore, the timely detection of anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein antibodies (MOG-IgG) becomes crucial when performing a differential diagnosis. Currently, the cell-based assay (CBA) is considered the gold standard, demonstrating high specificity (>98%) across all assays. Nevertheless, although commercial kits have contributed to diagnostic advances, their high cost limits accessibility in Mexico. The lack of access to specific testing imposes a financial burden and perpetuates both the risk of misdiagnosis and inappropriate therapeutic management. Given this scenario, this study aims to standardize the CBA in a tertiary care hospital to provide an affordable and timely alternative that directly benefits the Mexican population. A total of 78 peripheral blood samples were analyzed: 31 from patients with a MOGAD diagnosis and 47 from individuals with distinct neurological diseases and healthy controls. These samples were processed using two antibody detection methods to confirm MOG-IgG positivity: the first method was conducted using the commercial Euroimmun Anti-MOG IIFT kit, and the second via a standardized CBA. HeLa cell line stabilization and culture, plasmid replication and purification, as well as cell transfection were successfully achieved. Additionally, sociodemographic and clinical characteristics were analyzed, identifying a predominance of the optic neuritis clinical phenotype among positive cases, which aligns with international literature.

La enfermedad asociada a anticuerpos contra la glicoproteína de la mielina del oligodendrocito (MOGAD) se ha definido recientemente por diversos paneles internacionales como una entidad distinta a otras enfermedades desmielinizantes, sin embargo, continúa siendo un problema emergente y desafiante debido a la sintomatología que comparte con la esclerosis múltiple (EM) y la neuromielitis óptica (NMOsd), por lo que la detección oportuna de anticuerpos anti-glicoproteína de la mielina de los oligodendrocitos (MOG-IgG) cobra importancia al momento de hacer un diagnóstico diferencial. Actualmente el ensayo basado en células (EBC) se posiciona como el estándar de oro demostrando una alta especificidad (>98%) en todos los ensayos. No obstante, aunque la existencia de kits comerciales ha aportado al avance diagnóstico, su costo es elevado e imposibilita la accesibilidad en México. La falta de acceso a pruebas específicas implica una carga económica y perpetúa el riesgo de falla en el diagnóstico, así como manejos terapéuticos incorrectos. Ante este escenario, el estudio tiene como objetivo estandarizar el EBC en un hospital de tercer nivel, con el fin de proporcionar una alternativa costeable y oportuna que beneficie directamente a la población mexicana. Se analizaron 78 muestras de sangre periférica, 31 con diagnóstico de MOGAD y 47 con diagnóstico de enfermedades neurológicas distintas y sujetos sanos. Estas muestras fueron analizadas por dos métodos de determinación de anticuerpos para corroborar positividad a anti-MOG IgG, el primer método fue llevado a cabo con el kit comercial Euroimmun “Anti-MOG IIFT” y el segundo por medio de EBC estandarizado. Se logró la estabilización y cultivo de la línea celular HeLa, la replicación y purificación del plásmido, así como la transfección celular. Asimismo, se analizaron las características sociodemográficas y clínicas identificando la predominancia del fenotipo clínico de neuritis óptica en los casos positivos, lo que concuerda con la literatura internacional.