Síntesis, actividad in silico e in vitro de derivados del ácido litocólico con grupos N-arilamino en posición C3 como inhibidores de la PTP1B para el tratamiento de la diabetes tipo 2 y obesidad.

Abstract

En años recientes, la proteína tirosina fosfatasa 1B (PTP1B) se ha convertido en una diana farmacológica prometedora para el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) y la obesidad, dando lugar al desarrollo de terapias enfocadas en la inhibición de PTP1B. En el presente trabajo se presentan 15 nuevos derivados del ácido litocólico con un grupo α–bencilaminometilo en la posición C3 del esteroide, los cuales fueron evaluados en la forma corta (hPTP1B1–285) y larga (hPTP1B1–400) de PTP1B. Los derivados evaluados inhibieron la enzima PTP1B. Conjuntamente, estos presentaron una mejor inhibición de hPTP1B1–400 versus hPTP1B1–285, además de ser selectivos en comparación con la proteína tirosina fosfatasa de células T (TCPTP). En ensayos de cinética enzimática, mostraron una inhibición acompetitiva de PTP1B. Mediante ensayos celulares se determinó también el potencial anti–obesidad, vía la inhibición de un modelo de diferenciación de pre–adipocitos a adipocitos con células 3T3–L1. Los compuestos 6c y 6l inhibieron la diferenciación a adipocitos, mostrando un perfil similar al del control, atorvastatina. Ensayos de citotoxicidad fueron llevados a cabo mediante el método de sulforrodamina B (SRB) empleando células HFF–1 y 3T3–L1. Los compuestos 6c y 6l destacaron al no mostrar potencial citotóxico en el rango de concentración evaluado (3.125–100 uM), mientras que los derivados 6m y 6n presentaron concentraciones citotóxicas medias (CC50) alrededor de 40 uM en ambas líneas celulares. Estudios de acoplamiento molecular y simulaciones de dinámica molecular (MDS) fueron diseñados para determinar el modo de interacción de los nuevos derivados con la región desestructurada de la enzima. Los estudios de acoplamiento molecular revelaron interacciones de tipo hidrofóbico, así como puentes de hidrógeno con residuos de aminoácidos de la región desestructurada. Por su parte, las MSD mostraron que estas interacciones prevalecen durante la simulación (200 ns), mostrando la importancia de esta región en la actividad biológica e inhibición de PTP1B.