Estudio de los microRNAs plasmáticos y sus parámetros bioquímicos en pacientes con diabetes mellitus tipo 2

Abstract

El presente informe se describe las actividades realizadas durante el servicio social en el Departamento de Fisiología del Instituto Nacional de Cardiología Ignacio Chavez, dentro del proyecto “Estudio de los microRNAs plasmáticos y sus parámetros bioquímicos en pacientes con diabetes mellitus tipo 2”. DM2 es una enfermedad metabólica crónica que está asociada con alteraciones moleculares que contribuyen al desarrollo de complicaciones, como el pie diabético. Dentro del contexto, los microRNAs circulantes han emergido como posibles biomarcadores debido a que son reguladores en procesos como inflamación, angiogénesis y metabolismo de la glucosa. El objetivo de este trabajo fue estandarizar las técnicas de extracción de RNA plasmático, síntesis de cDNA y cuantificación mediante RT-qPCR para la detección de miRNAs que están asociado a DM2. Como resultados se obtuvieron la optimización en el manejo de muestras plasmáticas, la extracción de RNA total enriquecido en miRNAs utilizando el kit miRNeasy Serum/Plasma de Qiagen, la retrotranscripción con primers tipo stem-loop y la amplificación mediante sondas TaqMan. La estandarización permitió poder establecer condiciones experimentales reproducibles, mejorar la eficiencia de retrotranscripción y amplificación, garantizando resultados confiables y consistentes. La metodología fortalece una base sólida para futuros estudios orientados a la identificación de perfiles de expresión de miRNAs en el ámbito clínico.

This report describes the activities carried out during the social service in the Department of Physiology at the National Institute of Cardiology Ignacio Chávez, within the project entitled “Study of plasma microRNAs and their biochemical parameters in patients with type 2 diabetes mellitus.” Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a chronic metabolic disease associated with molecular alterations that contribute to the development of complications, such as diabetic foot. In this context, circulating microRNAs have emerged as potential biomarkers due to their regulatory role in processes such as inflammation, angiogenesis, and glucose metabolism. The objective of this work was to standardize the techniques for plasma RNA extraction, cDNA synthesis, and quantification by RT-qPCR for the detection of miRNAs associated with T2DM. The results included the optimization of plasma sample handling, the extraction of total RNA enriched in miRNAs using the miRNeasy Serum/Plasma Kit (Qiagen), reverse transcription using stem-loop primers, and amplification using TaqMan probes. This standardization made it possible to establish reproducible experimental conditions, improve the efficiency of reverse transcription and amplification, and ensure reliable and consistent results. The methodology provides a solid foundation for future studies aimed at identifying miRNA expression profiles in the clinical setting.