''Fragmentación de ADN en espermatozoides de epidídimo en ovinos a diferentes horas postmortem''

Abstract

La extracción de espermatozoides de cola de epidídimo en carneros y su utilización ha sido estudiada desde hace varias décadas por algunos autores, en diversas técnicas de reproducción asistida hasta la actualidad. Pese a que cada vez hay más conocimientos sobre la capacidad fértil de espermatozoides epididimales, aún faltan estudios en fragmentación del ADN de los espermatozoides durante su almacenamiento post-mortem y poder predecir su impacto en la fecundación y gestación. El estudio tuvo como objetivo principal evaluar la fragmentación del ADN espermático en muestras obtenidas de la cola del epidídimo de ovinos a diferentes intervalos de tiempo post-mortem (24, 48 y 72 horas). Se utilizaron muestras de 15 ovinos adultos obtenidas en un rastro municipal. Los testículos fueron transportados y conservados a 4°C en solución salina. La recuperación de los espermatozoides se realizó mediante la técnica de lavado retrógrado epididimal, la cual consiste en introducir medio de cultivo (Andersen) a través del conducto deferente para forzar la salida del contenido de la cola del epidídimo. Para el análisis, se emplearon las siguientes técnicas: Espermograma clásico: Evaluación de vitalidad (tinción eosina), motilidad progresiva y concentración (cámara de Neubauer). Prueba de Naranja de Acridina: Técnica de fluorescencia para detectar fragmentación de ADN; el ADN íntegro emite fluorescencia verde, mientras que el desnaturalizado emite roja. Los resultados demostraron una degradación progresiva de la calidad seminal conforme aumentó el tiempo post-mortem: Viabilidad: Descendió de un promedio de 88% a las 24 horas a un 65.2% a las 72 horas. Motilidad Progresiva: Reducción del 79.2% (24 h) al 59.4% (72 h). Aunque se cumplieron los objetivos como la descripción de la técnica y la evaluación de 30 muestras, el informe señala que las tinciones de fluorescencia para ADN no pudieron completarse en su totalidad. No obstante, los datos confirman que el tiempo transcurrido desde la muerte afecta negativamente la integridad física y funcional del espermatozoide.