Evaluación de la expresión de proteínas renales en muestras obtenidas de riñones de ratones transgénicos

Abstract

This final report describes the activities carried out during the social service performed from May 19 to November 19, 2025, at the Experimental Physiology Laboratory of the UNAM–INC Research Unit, within the Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez.” The main objective of the social service was to strengthen professional training through the development of practical skills in molecular biology and biochemistry techniques, focused on the analysis of renal proteins in transgenic mouse models. During the work period, certified training was received in the handling of laboratory animals at the National Institute of Medical Sciences and Nutrition “Salvador Zubirán,” which enabled the performance of monitoring, care, and manipulation activities of mice in accordance with NOM-062-ZOO-1999 and the ethical guidelines of the CICUAL. These skills were essential for the proper collection of renal tissue samples intended for molecular analysis. The technical activities carried out included the preparation of specialized solutions and reagents, homogenization and lysis of renal tissue, protein extraction and storage, and protein quantification using the BCA assay. In addition, complete SDS-PAGE electrophoresis and Western blot procedures were performed, from protein separation in polyacrylamide gels to transfer, blocking, antibody incubation, and chemiluminescent detection using the ChemiDoc™ system. These methodologies made it possible to evaluate the expression of proteins involved in key mechanisms of renal ion transport, such as NCC, pNCC, SPAK, pSPAK, and γENaC, which are fundamental components for understanding processes related to hydroelectrolytic balance and renal pathophysiology. Participation in these activities not only strengthened technical and scientific training, but also contributed to the development of biomedical research projects aimed at understanding kidney diseases, which represent a growing challenge for health systems. Finally, the social service promoted integration into a real research environment, encouraged ethical and responsible work with animal models, and allowed the application of theoretical knowledge acquired during the undergraduate program to concrete experimental situations. This experience consolidated essential professional competencies for the practice of biology in academic, clinical, and research settings.

El presente informe final describe las actividades realizadas durante el servicio social efectuado del 19 de mayo al 19 de noviembre de 2025 en el Laboratorio de Fisiología Experimental de la Unidad de Investigación UNAM–INC, dentro del Instituto Nacional de Cardiología “Ignacio Chávez”. El objetivo principal del servicio social fue fortalecer la formación profesional mediante el desarrollo de habilidades prácticas en técnicas de biología molecular y bioquímica, enfocadas en el análisis de proteínas renales en modelos de ratones transgénicos. Durante el periodo de trabajo se recibió capacitación certificada en el manejo de animales de experimentación en el Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición “Salvador Zubirán”, lo que permitió realizar actividades de monitoreo, cuidado y manipulación de ratones conforme a la NOM-062-ZOO-1999 y los lineamientos éticos del CICUAL. Dichas habilidades fueron fundamentales para la obtención adecuada de muestras de tejido renal destinadas al análisis molecular. Las actividades técnicas desarrolladas incluyeron la preparación de soluciones y reactivos especializados, la homogeneización y lisis de tejido renal, la obtención y almacenamiento de proteínas, y su cuantificación mediante el ensayo BCA. Asimismo, se ejecutaron procedimientos completos de electroforesis SDS-PAGE y Western blot, desde la separación de proteínas en geles de poliacrilamida hasta su transferencia, bloqueo, incubación con anticuerpos y revelado mediante quimioluminiscencia en el sistema ChemiDoc™. Estas metodologías permitieron evaluar la expresión de proteínas involucradas en mecanismos clave del transporte iónico renal, como NCC, pNCC, SPAK, pSPAK y γENaC, componentes fundamentales para comprender procesos relacionados con el equilibrio hidroelectrolítico y la fisiopatología renal. La participación en estas actividades no solo fortaleció la formación técnica y científica, sino que también contribuyó al desarrollo de proyectos de investigación biomédica orientados al entendimiento de enfermedades renales, las cuales representan un reto creciente para los sistemas de salud. Finalmente, el servicio social favoreció la integración en un entorno de investigación real, fomentó el trabajo ético y responsable con modelos animales, y permitió aplicar conocimientos teóricos adquiridos en la licenciatura a situaciones experimentales concretas. Esta experiencia consolidó competencias profesionales esenciales para el ejercicio de la biología en ámbitos académicos, clínicos y de investigación