Cultivos primarios de fibroblastos a partir de piel refrigerada y vitrificada en intervalos de: 1, 14, 30 y 60 días de conservación

Abstract

Los biobancos son colecciones de muestras biológicas (cultivos de células viables o tejidos) que están preservadas a un nivel molecular, usualmente congeladas. Siendo el objetivo principal la preservación de las células con fines de investigación o su uso en tecnologías de reproducción asistida. Comúnmente dentro de los establos o lugares de trabajo no existen las instalaciones o el equipo necesario para la adecuada conservación de tejidos, principalmente de los animales de interés que mueren inesperadamente. Por ello existe la necesidad de desarrollar un método para la preservación de los tejidos in situ, el cual debe ser seguro, simple y rápido, pero que a la vez se mantenga la viabilidad de la muestra para su posterior uso en la generación de cultivos primarios. Se obtuvieron 3 orejas provenientes de diferentes individuos sacrificados en un rastro de la comunidad de Rio Frío, Estado de México, estas fueron procesadas y conservadas en el Laboratorio de Manejo de la Reproducción de la Universidad Autónoma Metropolitana, unidad Xochimilco por diferentes intervalos de tiempo a 4°C en PBS 1x, realizando cultivos cada 1, 14, 30 y 60 días, al mismo tiempo se vitrificaron explantes de cada intervalo de tiempo para después desvitrificarlos y realizar cultivos de fibroblastos con estos, para observar los efectos que la criopreservación pueda hacer sobre la viabilidad de los tejidos. Los cultivos realizados a partir de piel refrigerada se obtuvieron fibroblastos de los tejidos con 1, 14 y 30 días de refrigeración, el tiempo en presentar las primeras células y en aumentar la confluencia aumentaba según aumentaban los días en refrigeración. Se obtuvieron fibroblastos de muestras desvitrificadas con 1 y 14 días de conservación a 4°C. Concluyendo que pueden obtenerse células viables hasta con 30 días de haber muerto el caballo, mientras el tejido se mantenga en condiciones óptimas para su conservación, también si los protocolos de vitrificación se llevan a cabo correctamente es posible obtener fibroblastos derivados de tejidos criopreservados por diferentes intervalos de tiempo.