Evaluación del efecto antitrombótico de 17-8 beta aminoestrógenos

Abstract

Thrombosis is a process that affects the global population, thus the design of new drugs with estrogenic effect without side effects, which benefit patients undergoing hormone replacement therapy, menopausal patients, and people requesting sex change; as contraceptive and antithrombotic agents, are constantly being developed and researched. Our group has synthesized substituted estrogens at the 17-β position of the estrogenic nucleus, with potentially antithrombotic effects, since they can decrease platelet aggregation and induce the formation of platelet-derived microvesicles (MVs), which could contribute to a lower risk of developing thrombosis. Our objective was to determine the effect of Buolame and Dieoctad on primary and secondary hemostasis, as well as to identify the effect of 17β-aminoestrogens on the generation of MVs and their role in fibrinolysis. The hypothesis of this work is that aminoestrogens, due to their physicochemical characteristics, will have effects on platelet aggregation, ATP production, clot retraction, and modifications in microvesicle formation. For this purpose, the Effective Concentration 50 (EC50) was identified through dose-response curves of aminoestrogens using 3 different concentrations 5, 50 and 500 µM. The activity of aminoestrogens on platelet aggregation in whole blood platelet-rich plasma (PRP) was determined, induced with: adenosine diphosphate (ADP), epinephrine and collagen, as agonist agents. The effect of estrogens substituted in the 17-β position on the release of adenosine triphosphate (ATP) from platelets was determined, in vitro experiment, with ADP, collagen and epinephrine as aggregating agents. The antithrombotic activity (clot size) of estrogens was determined in vitro. The effect of estrogens substituted in the 17-β position on the concentration of MVs was determined in vivo. The present study shows that Buolame and Dieoctad possess antiplatelet activity, and that one of the possible mechanisms Buolame uses to achieve this effect is the inhibition of platelet degranulation. These results demonstrate that Buolame and Dieoctad have a potential protective effect against thrombotic events associated with estrogen use, positioning this compound as a potential molecule with a favorable cardiovascular profile.

La trombosis es un proceso que afecta a la población mundial, por lo que el diseño de nuevos fármacos, con efecto estrogénico sin efectos secundarios, que beneficie a pacientes que se encuentren bajo tratamiento de terapia de reemplazo hormonal, en pacientes menopáusicas y en personas que solicitan cambio de sexo; como agentes anticonceptivos y antitrombóticos están en constante desarrollo e investigación. Nuestro grupo ha sintetizado estrógenos sustituidos en la posición 17-β del núcleo estrogénico, con efectos potencialmente antitrombóticos, ya que pueden disminuir la agregación plaquetaria e inducir la formación de microvesículas (MV s) derivadas de plaquetas, lo que podría contribuir a un menor riesgo del desarrollo de trombosis. Nuestro objetivo fue determinar el efecto de Buolame y Dieoctad en hemostasia primaria y secundaria, así mismo, identificar el efecto de los 17β-aminoestrógenos en la generación de Mvs y el papel de éstas en la fibrinólisis. La hipótesis del presente trabajo es que los aminoestrógenos por sus características fisicoquímicas tendrán efectos en la agregación plaquetaria, producción de ATP, retracción de coágulo, y modificaciones en la formación de microvesículas. Para ello se identificó la concentración Efectiva 50 (CE50) a través de curvas dosis-respuesta de los aminoestrógenos empleando 3 diferentes concentraciones 5, 50 y 500 µM. Se determinó la actividad de los aminoestrógenos sobre la agregación plaquetaria en sangre total en plasma rico en plaquetas (PRP), inducida con: adenosin difosfato (ADP), epinefrina y colágeno, como agentes agonistas. Se determinó el efecto de los estrógenos substituidos en la posición 17-β sobre la liberación del adenosin trifosfato (ATP) de las plaquetas, experimento in vitro, con ADP, colágeno y epinefrina como agentes agregantes. Se determinó la actividad antitrombótica (tamaño del coágulo), in vitro, de los estrógenos. Se determinó el efecto de los estrógenos substituidos en la posición 17-β, in vivo, sobre la concentración de MVs. El presente trabajo muestra que Buolame y Dieoctad poseen actividad antiagregante plaquetaria y que uno de los posibles mecanismos que utiliza el Buolame para lograr este efecto es la inhibición de la degranulación plaquetaria. Estos resultados muestran que el Buolame y Dieoctad tienen un potencial efecto protector frente a eventos trombóticos asociados al uso de estrógenos, posicionando a este compuesto como una posible molécula con perfil cardiovascular favorable.