Efecto de IL-4 Y IL-17A sobre Genes Blanco de FOXO3A en Líneas de Fibroblastos Control y de Neumonitis por Hipersensibilidad

Abstract

En el presente trabajo se evaluó el efecto de las citocinas IL-4 e IL-17A sobre la expresión del factor de transcripción FoxO3a en fibroblastos pulmonares de humanos sanos. Las enfermedades pulmonares intersticiales difusas, como la fibrosis pulmonar idiopática y la neumonitis por hipersensibilidad, comparten mecanismos inflamatorios y fibróticos en los que IL-4 presenta funciones antiinflamatorias y profibróticas, mientras que IL-17A, expresa efectos proinflamatorios que desempeñan un papel relevante. FoxO3a, por su participación en la regulación de la apoptosis, el estrés oxidativo y la proliferación celular, podría estar implicado en la fisiopatología de dichas patologías y representar un posible blanco terapéutico. Para el desarrollo del estudio se cultivaron tres líneas celulares de fibroblastos pulmonares control y se estimularon con IL-4, IL-17A y la combinación de ambas durante 24 horas. La expresión génica de FoxO3a se analizó mediante PCR en tiempo real, utilizando HPRT y GAPDH como genes endógenos, y la proteína se evaluó en fracciones nucleares y citoplasmáticas mediante Western Blot. Los resultados mostraron que dos de las líneas celulares presentaron cambios significativos en la expresión de FoxO3a frente a los estímulos, mientras que la tercera línea control no evidenció variaciones. En una de las líneas, la combinación de IL-4 e IL-17A aumentó la expresión del gen respecto al control, mientras que IL-4 sola la disminuyó; en la otra, tanto IL-4 como la combinación provocaron un incremento en la expresión. El análisis proteico mostró patrones concordantes con los resultados de la expresión génica, lo que sugiere que las citocinas evaluadas no solo influyen en la transcripción de FoxO3a, si no también en su cantidad y localización intracelular. La variabilidad observada entre líneas celulares indica la existencia de factores intrínsecos que condicionan la respuesta de los fibroblastos a las vías de señalización activadas por IL-4 e IL-17A. En conclusión, FoxO3a mostró ser sensible a la estimulación por IL-4 e IL-17A en fibroblastos pulmonares sanos, con respuestas diferenciales dependiendo de la línea celular y del tipo de estímulo. Estos hallazgos respaldan la relevancia potencial de FoxO3a en procesos de reparación tisular y fibrosis pulmonar, y sugieren la necesidad de ampliar la investigación a modelos derivados de pacientes para profundizar en los mecanismos de regulación y su viabilidad como objetivo terapéutico.