Evaluación de Trastornos Genéticos a Través de Cariotipos: Técnicas de Citogenética Convencional en la Práctica Diagnóstica

Abstract

En el departamento de citogenética se aplican técnicas que permiten diagnosticar trastornos genéticos a través de cariotipos, para formar éste se requiere de la obtención de metafases mediante el procesamiento de muestras como sangre periférica y medula ósea. En este informe se muestra cada paso del procesamiento de la muestra, como primer paso se requiere de un cultivo celular que permitirá la proliferación y así obtener más células en metafase, cada muestra tiene diferentes tiempos de incubación, después del tiempo transcurrido se procede a la cosecha, aquí se involucra la adición de reactivos como bromuro de etidio y colcemid/colchichina para elongar los cromosomas además de inhibir la división celular en metafase. Luego se realiza el goteo del botón celular obtenido en la cosecha, el objetivo de esta técnica es la fijación de metafases en portaobjetos para que queden extendidos ya que se teñirán al poco tiempo después. La tinción consta de someter los portaobjetos en tripsina, buffer, colorante Wright y Giemsa a diferentes tiempos para que se tiñan las bandas de los cromosomas, esto para una identificación mas fácil de cada uno de ellos, además de la detección de alguna anormalidad cromosómica. Con ayuda de microscopia se capturan las metafases de cada portaobjeto, al ingresarlas al software Ikaros este permitirá identificarlos y organizarlos en los diferentes grupos desde el A hasta el G, y los cromosomas sexuales. Las metafases tienen que ser de buena calidad y cumplir ciertos parámetros para su análisis como por ejemplo: índice mitótico, citoplasma, apertura y tamaño. El cariotipo generado por el software debe estar revisado por un químico analista y detectar las anomalías encontradas según sea el caso.