Evaluación de Actividad Tripanocida de Aceites Esenciales en Epimastigotes de Trypanosoma cruzi

Abstract

Chagas disease, caused by the flagellated parasite Trypanosoma cruzi, represents a significant public health concern, affecting an estimated 6 to 8 million people and resulting in approximately 50,000 deaths annually. Conventional treatments, based on Benznidazole and Nifurtimox, present notable limitations due to their adverse effects and poor efficacy during the chronic phase of the disease, highlighting the need for safer therapeutic alternatives. In this context, the present study evaluated the effect of Cinnamomum verum essential oil on in vitro Trypanosoma cruzi infection. Epimastigotes of the parasite were cultured in LIT medium supplemented with hemin, bovine serum, and penicillin, incubated at 28 °C, with weekly subcultures performed to maintain exponential growth. Growth curves were established by counting with a Neubauer chamber at 1, 24, 48, 72, 96, and 120 hours, enabling characterization of the lag, exponential, and stationary phases. Antiparasitic activity was assessed by exposing cultures to varying concentrations of C. verum essential oil (5, 10, 20, 40, and 80 µg/mL) and determining the half-maximal inhibitory concentration (IC50) using GraphPad analysis. In addition, the chemical composition of the oil was analyzed by gas chromatography, revealing that eugenol was the predominant component, accounting for 68.8% of the total chromatographic area, confirming extract quality. Results showed that low concentrations (5 and 10 µg/mL) did not alter epimastigote growth compared to controls, whereas higher doses (40 and 80 µg/mL) significantly reduced parasite numbers (p < 0.05), demonstrating a dose-dependent effect. In parallel, cytotoxicity of the oil was evaluated in Vero cell cultures using the Presto Blue reagent to determine cell viability; the assays indicated that the tested concentrations did not significantly compromise viability, supporting a low-toxicity profile. In conclusion, C. verum essential oil exhibits notable antiparasitic potential against T. cruzi at high concentrations without inducing cytotoxicity in cell lines, positioning it as a promising therapeutic alternative for Chagas disease management and suggesting the need for further preclinical and in vivo studies to confirm its efficacy and safety.

La enfermedad de Chagas, causada por el parásito flagelado Trypanosoma cruzi, representa un problema de salud pública de considerable importancia al afectar de 6 a 8 millones de personas y provocar cerca de 50,000 muertes anuales. Los tratamientos convencionales, basados en Benznidazol y Nifurtimox, presentan limitaciones notables debido a sus efectos adversos y a la deficiente eficacia en la fase crónica de la enfermedad, lo que demanda la búsqueda de alternativas terapéuticas más seguras. En este contexto, el presente estudio evaluó el efecto del aceite esencial de Cinnamomum verum sobre la infección in vitro por Trypanosoma cruzi. Se cultivaron epimastigotes del parásito en medio LIT suplementado con hemina, suero bovino y penicilina, incubándose a 28 °C y realizando subcultivos semanales para mantener la fase exponencial. Se establecieron curvas de crecimiento mediante conteos en cámara de Neubauer en intervalos de 1, 24, 48, 72, 96 y 120 horas, lo que permitió caracterizar las fases lag, exponencial y estacionaria. La actividad antiparasitaria se evaluó exponiendo los cultivos a diferentes concentraciones del aceite esencial de Cinnamomum v. (5, 10, 20, 40 y 80 µg/mL) y determinando la concentración inhibitoria media (IC50) mediante análisis en GraphPad. Además, la composición química del aceite se analizó por cromatografía de gases, revelándose que el eugenol es el componente predominante, representando el 68.8 % del área total del cromatograma, lo cual certifica la calidad del extracto. Los resultados demostraron que las concentraciones bajas (5 y 10 µg/mL) no alteraron el crecimiento de los epimastigotes en comparación con los controles, mientras que dosis superiores (40 y 80 µg/mL) indujeron una reducción significativa en el número de parásitos (p < 0.05), evidenciando un efecto dosis-dependiente. Paralelamente, se evaluó la citotoxicidad del aceite en cultivos de células Vero, utilizando el reactivo Presto Blue para determinar la viabilidad celular; los ensayos indicaron que las concentraciones estudiadas no comprometieron significativamente la viabilidad, subrayando un perfil de baja toxicidad. En conclusión, el aceite esencial de Cinnamomum v. exhibe un potencial antiparasitario notable contra T. cruzi a concentraciones elevadas, sin inducir citotoxicidad en líneas celulares, lo que lo posiciona como una alternativa terapéutica prometedora para el manejo de la enfermedad de Chagas y sugiere la necesidad de estudios preclínicos e in vivo adicionales para confirmar su eficacia y seguridad.