Clonación de los Genes AlkDs del Patógeno Humano Entamoeba histolytica en Vectores pET y Optimización de las Condiciones de Sobreexpresión de sus Productos Enzimáticos Recombinantes

Abstract

Entamoeba histolytica es el parasito protozooario que causa la amebiasis, la cuarta causa parasitaria de mortalidad en países en desarrollo. E. histolytica se ha convertido en un problema de salud pública al poseer diversos mecanismos de resistencia a drogas y vías de reparación del ADN, los cuales le permiten desarrollar resistencia a fármacos. Una de las rutas de reparación del ADN con las que cuenta E. histolytica es la reparación por escisión de bases (Base Excision Repair, BER) que es llevada a cabo por enzimas glicosilasas como las proteínas AlkD, cuya función principal se ha asociado con evitar inestabilidad genómica en este parásito. En este trabajo nos interesamos por estudiar y optimizar las condiciones de sobreexpresión de los productos enzimáticos recombinantes de AlkD 1, -2 y -3 con la finalidad de abordar algunas estrategias experimentales que nos permitan en el futuro, el desarrollo y producción de fármacos más eficaces contra la amebiasis. Logramos una expresión satisfactoria de las proteínas AlkD 2 y AlkD3. Sin embargo, consideramos necesario realizar una purificación de las tres proteínas recombinantes, esto con con la finalidad de obtener cantidades abundantes y altamente puras de cada una de ellas para ser usadas con diferentes fines para la investigación.