Expresión del Gen sbh de Bifidobacterium longum LBUX23 y Bifidobacterium pseudocatenulatum JCLA3, que Codifica para la Enzima Sal Biliar Hidrolasa y su Correlación con la Actividad Enzimática

Abstract

Las bifidobacterias son un grupo de bacterias beneficiosas que residen predominantemente en el intestino humano, especialmente en el colon. Se ha demostrado que B. pseudocatenulatum y B. longum poseen enzimas específicas, como las sal biliar hidrolasas (SBH), que permiten la fermentación de compuestos más complejos y que son clave para la tolerancia a las sales biliares, esenciales en su capacidad probiótica. Las sal biliar hidrolasas (SBH) descomponen los ácidos biliares, lo que permite que las bifidobacterias sobrevivan en el entorno hostil del tracto intestinal. Este estudio evaluó la expresión del gen que codifica para la sal biliar hidrolasa (sbh) en Bifidobacterium longum y Bifidobacterium pseudocatenulatum tras la exposición a Oxgall, una mezcla de sales biliares. Con el objetivo de evaluar la expresión del gen sbh, se establecieron 2 condiciones de cultivo para cada cepa. Una consistió en medio MRS-C (condición estándar) y la segunda en medio MRS-C suplementado con 0.3% p/v de Oxgall. Las cepas fueron cultivadas en estos medios y posteriormente se extrajo el ADNg y ARN de B. longum y B. pseudocatenulatum. Posteriormente se estudió la expresión del gen de la sbh de los microorganismos de estudio. Se observó una inducción significativa de la expresión génica. Estos resultados indican que las sales biliares actúan como estímulo para la activación del gen sbh, lo que sugiere un mecanismo adaptativo que facilita la supervivencia bacteriana en el tracto gastrointestinal. Los resultados muestran que la presencia de Oxgall afecta negativamente el crecimiento de ambas especies, aunque B. longum parece tolerarlo en mayor medida que B. pseudocatenulatum, lo que podría reflejar una mayor capacidad de adaptación al estrés biliar por parte de B. longum. Se utilizó PCR en tiempo real y el método 2^-ΔΔCt para cuantificar la expresión relativa del gen, utilizando el gen 16S rRNA como control endógeno. Los resultados mostraron que la presencia de Oxgall induce significativamente la expresión del gen SBH, con un aumento de 2.92 veces en B. longum y 2.38 veces en B. pseudocatenulatum en comparación con sus respectivos controles. Este trabajo contribuye al entendimiento de los mecanismos moleculares que sustentan la tolerancia biliar en bifidobacterias, con posibles aplicaciones en la selección de cepas probióticas con mayor funcionalidad.