Immunohistochemical Evaluation of NK Cells in HPV-related Oral Lesions From People Living with HIV/AIDS

Abstract

Oral HPV-related lesions (HPV-OL) in people living with HIV/AIDS(PLHIV) present atypical clinical features compared to those in the general population. NKcells play an essential role in the clearance of chronic viral infections, thus, an alteration inthis cell population could explain the often-uncommon features of these lesions in the context of HPV/HIV co-infection. Objective: To compare the immunoexpression of classic NK cells markers between HPV- OL from PLHIV and the general population. Materials and methods: Observational, cross-sectional and comparative study carried out at the Metropolitan Autonomous University in collaboration with the National Cancer Institute (INCan) and the two HIV reference centers in Mexico City. 71 cases of HPV-OL were included. A histopathological analysis of each case was performed with the corresponding slides stained with H&E and subsequently were organized in microarrays for immunohistochemical analysis of 3 classic markers for NK cells (CD56, perforin and granzyme B) and a T cell marker (CD3) to contrast lymphoid populations, with the Ventana Benchmark Ultra platform (Ventana Medical Systems, AZ, USA) and the UltraView detection system (Ventana Medical Systems, AZ, USA). Statistical analysis was performed with SPSS v.26 software, (IBM, NY, USA); measures of central tendency and dispersion were calculated for continuous variables, and proportions for categorical variables. The X2 test was used to establish the association between variables, with a statistical significance ofp ≤ 0.05. Results: A total of 71 cases of adult patients with HPV-OL were included, with a mean age of 43 (34-54) years, mostly men (66.2%), of whom 31 individuals were PLHIV and 41individuals were HIV-negative. The most frequent lesion was multifocal epithelial hyperplasia in PLHIV (32.5%), while in the HIV-negative group it was squamous papilloma (57.5%). PLHIV more frequently presented multiple lesions (58.1%), in comparison, HIV-negative individuals presented single lesions in 75.5%. The most frequent clinical site in both groups was tongue (41.8%) and labial mucosa (23.9%). No statistically significant differences were identified in the percentage of immunoexpression of the antibodies in lymphoid cells analyzed between the study groups or HPV-OL types (either NK or T cell markers), but a difference was found in the location of CD56 positive lymphocytes in PLHIV, which exhibited almost no intraepithelial expression (4.2%) in contrast to the group without HIV (41.4%) (p=0.05). Conclusions: HPV-OL in PLHIV exhibited a restriction at epithelial level of CD56 expression on their NK cells in contrast to their counterpart in the general population. We suggest that this finding could be related to a deficiency in their activation and could lead to a defect in their cytotoxic functions in this population group.

Las lesiones bucales asociadas a VPH (LB-VPH) en personas que viven con VIH/SIDA (PVV) pueden presentar características clínicas atípicas en comparación con las observadas en la población general. En ese sentido, las células NK juegan un papel esencial en la eliminación de infecciones virales crónicas, por lo que las alteraciones en esta población celular pueden ser factores relevantes asociados con las características poco comunes de estas lesiones en el contexto de la coinfección VPH/VIH. Objetivo: Comparar la inmunoexpresión de marcadores clásicos de células NK entre las LB VPH que presentan las PVV y la población general. Materiales y métodos: Estudio observacional, transversal y comparativo, realizado en la Universidad Autónoma Metropolitana en colaboración con el Instituto Nacional de Cancerología (INCan) y los dos centros de referencia de VIH en la Ciudad de México. Se incluyeron casos con diagnóstico histológico confirmado de LB-VPH, a los que se les realizaron microarreglos para el análisis inmunohistoquímico, utilizando tres marcadores de células NK (CD56, perforina y granzima B) y un marcador de células T (CD3) para contrastar poblaciones linfoides, utilizando la plataforma Ventana Benchmark Ultra (Ventana Medical Systems, AZ, USA) y el sistema de detección UltraView (Ventana Medical Systems, AZ, USA). El análisis estadístico se realizó con el software SPSS v.26, (IBM, NY, USA); se calcularon medidas de tendencia central y dispersión para las variables continuas, y proporciones para las variables categóricas. La asociación entre variables se realizó a través de la prueba X2, con una significancia estadística de p ≤ 0.05. Resultados: Se incluyeron 71 individuos con LB VPH, con una media de edad de 43 (34-54) años, mayoritariamente varones (66.2%), de los cuales 31 individuos eran PVV y 41 individuos sin VIH. La lesión más frecuente fue la hiperplasia epitelial multifocal en las PVV (32.5%), mientras que en el grupo sin VIH fue el papiloma escamoso (57.5%). Las PVV presentaron con mayor frecuencia lesiones múltiples (58.1%), en comparación con los individuos sin VIH, que presentaron lesiones únicas en 75.5%. El sitio anatómico más frecuente en ambos grupos fue la lengua (41.8%) y la mucosa labial (23.9%). No se identificaron diferencias estadísticamente significativas en el porcentaje de inmunoexpresión de los anticuerpos para células NK o T entre los grupos de estudio, o tipos de LB-VPH. Se encontró una diferencia estadísticamente significativa en la localización de los linfocitos CD56 positivos en las PVV que exhibió una expresión intraepitelial casi nula (4.2%) en contraste con el grupo sin VIH (41.4%) (p=0.05). Conclusiones: Las LB-VPH en PVV exhibieron restricción a nivel epitelial de la expresión de CD56 en sus células NK en contraste con su contraparte de la población general. Sugerimos que este hallazgo podría estar relacionado con una deficiencia en su activación y podría conducir a un defecto en sus funciones citotóxicas en este grupo de población