Influencia de las Plaquetas Sobre un Modelo de Esferoides Derivados de Células de Cáncer de Próstata

Abstract

El cáncer de próstata es una enfermedad que afecta a los hombres y se desarrolla cuando surge un tumor maligno en la glándula prostática. Es una de las principales causas de mortalidad masculina a nivel global, con más de 1.4 millones de nuevos casos anuales, y su diagnóstico se basa en la prueba del antígeno prostático específico (PSA) y biopsias. Recientemente, se ha identificado que las plaquetas juegan un papel crucial en la progresión del cáncer, promoviendo la angiogénesis, migración e invasión celular, así como la evasión del sistema inmune. Sin embargo, los estudios previos se han realizado principalmente en cultivos celulares en monocapa, que no replican adecuadamente el microambiente tumoral. Por ello, este proyecto busca evaluar el efecto del liberado plaquetas sobre la viabilidad, proliferación e integridad de los esferoides derivados de líneas celulares de cáncer de próstata. Los esferoides son modelos tridimensionales que imitan mejor las interacciones célula-célula y las condiciones del microambiente tumoral. Se utilizaron las líneas celulares LNCaP y PC3 para generar esferoides en placas de agarosa, evaluando su morfología, integridad y volumen. Se preparó un lisado de plaquetas humanas por ciclos de congelación/descongelación y un medio condicionado de plaquetas y células cancerosas para estudiar su efecto en la viabilidad celular de los esferoides. Los resultados preliminares muestran que el tratamiento con liberado de plaquetas afecta negativamente la morfología e integridad de los esferoides, generando huecos y alterando su forma. A pesar de que el liberado de plaquetas proporciona factores de crecimiento, su uso en concentraciones elevadas no favorece la viabilidad celular. En contraste, el medio condicionado derivado de cocultivos de plaquetas y células cancerosas mostró un aumento significativo en la viabilidad celular, sugiriendo que la comunicación celular y la señalización paracrina son fundamentales para la supervivencia de las células tumorales. En conclusión, aunque se estableció un modelo efectivo para la formación de esferoides de CaP, el uso de liberado de plaquetas no resultó ser la mejor alternativa para reemplazar el suero fetal bovino en este contexto. Se propone continuar investigando el uso de medios condicionados para mejorar la viabilidad y proliferación de los esferoides, lo que podría contribuir a una mejor comprensión de las interacciones celulares en el microambiente tumoral y avanzar en el desarrollo de terapias dirigidas contra el cáncer de próstata.

Prostate cancer is a disease that affects men and develops when a malignant tumor arises in the prostate gland. It is one of the leading causes of male mortality globally, with more than 1.4 million new cases annually, and its diagnosis is based on the prostate-specific antigen (PSA) test and biopsies. Recently, it has been identified that platelets play a crucial role in cancer progression, promoting angiogenesis, cell migration and invasion, as well as immune system evasion. However, previous studies have been mainly conducted in monolayer cell cultures, which do not adequately replicate the tumor microenvironment. Therefore, this project aims to evaluate the effect of platelet release on the viability, proliferation, and integrity of spheroids derived from prostate cancer cell lines. Spheroids are three-dimensional models that better mimic cell-cell interactions and tumor microenvironment conditions. The LNCaP and PC3 cell lines were used to generate spheroids in agarose plates, evaluating their morphology, integrity, and volume. A lysate of human platelets was prepared by freeze/thaw cycles and a conditioned medium of platelets and cancer cells to study its effect on the cell viability of the spheroids. Preliminary results show that treatment with platelet release negatively affects the morphology and integrity of the spheroids, generating gaps and altering their shape. Although platelet release provides growth factors, its use in high concentrations does not favor cell viability. In contrast, the conditioned medium derived from co-cultures of platelets and cancer cells showed a significant increase in cell viability, suggesting that cell communication and paracrine signaling are fundamental for the survival of tumor cells. In conclusion, although an effective model for the formation of CaP spheroids was established, the use of platelet release did not prove to be the best alternative to replace fetal bovine serum in this context. It is proposed to continue investigating the use of conditioned media to improve the viability and proliferation of spheroids, which could contribute to a better understanding of cell interactions in the tumor microenvironment and advance the development of targeted therapies against prostate cancer.