Diversidad Genética de Cepas de Enterococcus faecium Aisladas en el Hospital Infantil de México Federico Gómez en un Periodo de 10 Años

Abstract

INTRODUCTION: Enterococcus faecium is an opportunistic bacterium that supports numerous stresses, resists antibiotic treatment and persists in clinical environment and causing Healthcare Associated Infections (HCAIs). The excessive use of antibiotics to treat HCAIs has generated an increase in antibiotic resistance in bacteria over time. E. faecium has developed a significant increase in resistance to vancomycin. The use of molecular tools for its bacterial typing has allowed observe the genetic relationship of the isolates to determine the evidence of outbreaks of genetically or epidemiologically related isolates, their vigilance and follow-up through the use of the pulsed field gel electrophoresis (PFGE) technique. JUSTIFICATION: At the Hospital Infantil de México Federico Gómez, numerous cases of colonization and infection by vancomycin-resistant E. faecium (VREF) have been detected, it is important to obtain genetic diversity to elucidate its behavior in the hospital environment. OBJETIVE: To analyze the genetic diversity of E. faecium isolated in the last 10 years at the Hospital Infantil de México. METHODOLOGY: 188 strains of EFVR based on the PFGE protocol. This protocol consists of: I) the extraction of total DNA, II) digestion with the enzyme SmaI, III) the separation of restriction fragments on agarose gel in the PFGE equipment (CHEF MAPPER, Biorad), IV) It was revealed with Red Gel. The images were observed and acquired in a photodocumentation. RESULT: Of the 188 EFVR strains, more than half of the strains were isolated from female patients, most samples were from patients between 1 and 5 years of age, and the origin of the samples was mainly urine and most samples came from the Pediatric Intensive Care Unit, with a higher number of strains observed in 2012. Of these, 5 pulsotypes were identified, of which 6 strains presented the same macrorestriction profile. CONCLUSION: It can be seen that in recent years there has been a significant increase in the incidence of HCAIs caused by bacteria such as VREF, and in some periods genetically related strains were observed, based on their PFGE profile.

Enterococcus faecium es una bacteria oportunista que soporta numerosas tensiones, resiste el tratamiento con antibióticos y persiste en entornos clínicos y causa Infecciones Asociadas en Salud (IAAS). El uso excesivo de antibióticos para atender las IAAS ha generado con el tiempo un aumento en la resistencia a los antibióticos en las bacterias. E. faecium ha desarrollado un aumento significativo en la resistencia a la vancomicina. El uso de herramientas moleculares para su tipificación bacteriana ha permitido observar la relación genética de los aislamientos para determinar la evidencia de brotes de aislamientos relacionados genéticamente o epidemiológicamente, su vigilancia y seguimiento mediante el uso de la técnica de Electroforesis en Gel por Campo Pulsado (PFGE). JUSTIFICACIÓN: En el Hospital Infantil de México Federico Gómez, se han detectado numerosos casos de colonización e infección por E. faecium resistente a vancomicina (EFRV), por lo tanto, es importante obtener su diversidad genética que elucide su comportamiento en el ambiente hospitalario. OBJETIVO: Analizar la diversidad genética de E. faecium aisladas en los últimos 10 años en el Hospital Infantil de México. METODOLOGÍA: Se estudiaron 188 cepas de EFRV con base en el protocolo de PFGE. Dicho protocolo consistió en: I) la extracción de DNA total, II) digestión con la enzima SmaI, III) la separación de los fragmentos de restricción sobre gel de agarosa en el equipo de PFGE (CHEF MAPPER, Biorad) IV) revelado con Gel Red. Las imágenes observadas se adquirieron en un fotodocumetador. RESULTADOS: De las 188 cepas de EFVR más de la mitad de las cepas fueron aisladas de pacientes femeninas, la mayoría de las muestras fueron de pacientes entre 1 a 5 años y el origen de las muestras fueron principalmente de orina y en su mayoría provinieron de la Unidad de Terapia Intensiva Pediátrica, y en su mayoría fueron cepas en el año 2012. Los resultados de PFGE se identificaron 5 pulsotipos de donde 6 cepas presentaron el mismo perfil de macrorrestricción. CONCLUSIÓN: se puede constatar que en los últimos años se ha dado un aumento significativo en la incidencia de las IAAS por bacterias como EFRV y en algunos periodos se observaron cepas relacionadas genéticamente, con base en su perfil de PFGE.