Cuantificación de Lactobacilos y Aerobios Totales en Heces de Ratones BALB/c con Colitis Ulcerativa Sometidos a Estrés

Abstract

Normalmente la abundancia de la microbiota esta balanceada, sin embargo, algunas condiciones como la colitis ulcerosa y el estrés pueden causar disbiosis, en la cual ocurre una alteración del crecimiento de las poblaciones microbianas, como lactobacilos y aerobios totales. La cuenta fecal de lactobacilos y aerobios en ratones sometidos a estrés ha sido poco estudiada, no obstante, su importancia radica en que su estudio podría tener un impacto en el desarrollo de estrategias basadas en agentes inmunomoduladores para el control de colitis y el estrés.Se realizó un ensayo por duplicado en ratones BALB/c machos de ocho semanas de edad, divididos en un grupo de seis ratones tratado con (1) dextran sulfato de sodio (DSS) al 3% y un (2) grupo control tratado con agua, ambos sin estrés. Un último ensayo consistió en ratones tratados con (3) DSS al 3% y (4) grupo control, ambos sometidos a estrés por restricción de movimiento. En los tres ensayos se recolectaron en caldo tioglicolato heces a los 7 y 14 días después del tratamiento, se maceraron para preparar diluciones seriadas a 1:25, 1:250 y 1:2500 en el mismo caldo. Las suspensiones se cultivaron a 37°C, en agar TSA durante 24 horas en condiciones de aerobiosis para el cultivo de aerobios totales y en agar MRS durante 48 horas en anaerobiosis para cultivar lactobacilos. Las colonias bacterianas se contaron y los resultados se expresaron en unidades formadoras de colonias sobre gramo (UFC/g). Los datos que siguieron la normalidad se compararon con la prueba paramétrica ANOVA y la prueba post-hoc Tukey para evaluar diferencias significativas entre grupos; los datos que no siguieron la normalidad se analizaron con la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis y la prueba post-hoc Dunn, las diferencias se consideraron significativas cuando P<0.05.