Obtención y Evaluación de Ácidos Nucleicos para la Generación de Controles Empleados en Métodos Moleculares

Abstract

La Comisión de Control Analítico y Ampliación de Cobertura (CCAYAC) es el Laboratorio Oficial de Control de la COFEPRIS y realiza análisis de laboratorio de productos de uso y consumo humano sujetos a control sanitario. Dentro de todos los análisis que se realizan en éste laboratorio se incluyen análisis basados en ácidos nucleicos, que ofrecen mayor sensibilidad y especificidad, así como una reducción del tiempo de respuesta. Los controles positivos son estándares absolutos para los ensayos moleculares y permiten evaluar posibles falsos negativos y garantizar resultados confiables. El trabajo se basó en la extracción y purificación de ADN genómico para controles empleados en métodos moleculares de tres microorganismos (Salmonella, Vibrio cholerae y Vibrio parahemolyticus) y un producto comercial (harina de maíz). Se buscó que en los microorganismos presentaran genes específicos toxigénicos causantes de enfermedades patógenas en humanos y en el producto comercial genes considerados como presencia persuasiva de organismos genéticamente modificados (OGMs). Las características principales en la extracción de ADN genómico en microorganismos son bandas definidas de alto peso molecular el cual se demostró en las muestras de Salmonellas y V. cholerae, caso que no se repitió en las muestras de V. parahemolyticus debido a condiciones que afectaron la purificación. Para el caso de las muestras de OGMs es una banda no definida de bajo peso molecular sin presentar degradación a lo largo de la electroforesis. Las muestras trabajadas para V. cholerae fueron evaluadas por personal adiestrado del laboratorio y resguardadas para futuros análisis en condiciones de ultracongelación. Las muestras restantes, a fecha de término de mi estancia, fueron resguardadas para ser evaluadas a posteridad.