Validación del Modelo 6-OHDA para Inducir la Enfermedad de Parkinson en Ratas Wistar Macho

Abstract

La Enfermedad de Parkinson se caracteriza por el movimiento involuntario, rigidez muscular, bradicinesia, inestabilidad postural y dificultad para iniciar la marcha. Existen diferentes modelos animales que reproducen la enfermedad para su estudio, uno de los más empleados es el modelo de la 6-hidroxidopamina (6-OHDA), donde ocurre una pérdida de neuronas dopaminérgicas en la sustancia nigra pars compacta (SNpc) de hasta el 80%. En el presente trabajo se validó la funcionalidad de este modelo, para lo cual se formaron los grupos 6-OHDA (n=6) y SHAM (n=6) de ratas Wistar macho. Al grupo 6-OHDA se le produjo una lesión unilateral del lado izquierdo del cerebro con la toxina 6-OHDA, mientras que al grupo SHAM se le realizó una “falsa cirugía” sin la administración de la toxina, y luego de una recuperación de 14-20 días a ambos grupos se les evaluó la conducta motora por medio de la prueba de cilindro y la prueba de giro o apomorfina; finalmente se empleó la técnica de inmunohistoquímica con las muestras de tejido obtenidas, para determinar la enzima tirosín hidroxilasa (TH) en la SNpc por medio del análisis densitométrico y conteo neuronal. Se encontró como resultado una alteración en la conducta. Además, el análisis densitométrico de la inmunorreactividad a TH resultó en una disminución de TH en la SNpc en el grupo 6-OHDA en comparación con el grupo SHAM (p < 0.001), lo cual se correlacionó con la pérdida de neuronas dopaminérgicas; por otro lado, la cuantificación por conteo neuronal mostró una pérdida de neuronas positivas a TH en la SNpc del lado IL, a diferencia de aquellas ratas que habían recibido inyección del vehículo (p < 0.01), con un promedio de pérdida del ~80% de neuronas. Se comprobó la eficacia del modelo 6-OHDA para mimetizar la pérdida de neuronas dopaminérgicas, así como la presencia de los síntomas clásicos de la Enfermedad de Parkinson. La reproducibilidad de este modelo se debe a la selectividad relativa sobre catecolaminas (como la dopamina) y a la inducción de lesiones estables en la SNpc. Así mismo, se determinó que la técnica de IHC es útil para identificar la pérdida de neuronas dopaminérgicas inducida por la lesión en la SNpc con 6-OHDA en ratas.