Efectos del Quitosán-coumestrol Sobre el Tejido Testicular en Rata (Rattus rattus) y su Posible Empleo en el Control de Fauna Feral

Abstract

El coumestrol (COU), de acuerdo a su estructura química, pertenece a la familia de fitoestrógenos de los coumestanos, (Setchell et al., 1981; Glitso et al., 2000; Lenis et al., 2010). Los fitoestrógenos son sustancias producidas por las plantas con una estructura similar al estradio1-1713, por lo que imitan la acción de los estrágenos e ingresan a las células blanco y al unirse a receptores estrogénicos a y 13 como antagonistas, produciendo alteraciones en el aparato reproductor de los machos, y su respuesta es dependiente de la dosis aplicada (Pérez-Rivero et al., 2009). La quitina es un polisacárido distribuido en la naturaleza como principal componente del exoesqueleto de los crustáceos (Senel y Mclure, 2004) y tiene la capacidad de formar geles en pH ácidos por su naturaleza policatiónica (Senel y Mclure, 2004). El quitosán es un polímero de acetil-glucosamina obtenido de una des acetilación termo alcalina heterogénea de la quitina (Hernández-Cocoltzi et al., 2009) cuya biodegradación lleva a la liberación de aminoazkares, que se incorporan a las vías metabólicas de las glicoproteínas (Zhang y Neau, 2002). Se utilizaron 45 ratas macho raza Wistar de 9 semanas de edad, asignadas a 3 grupos de manera aleatoria, cada grupo conformado por 15 animales. Correspondiendo al grupo 1, los animales control; al grupo 2 los animales implantados con 800 pl de coumestrol/ 300 pl quitosan vía subcutánea y al grupo 3 los animales implantados con 1600 pl de coumestrol/ 300 pl de quitosan vía subcutánea; se mantuvieron con el implante por cuatro semanas y a partir de la semana 5 se obtuvieron los testículos de 3 animales de cada grupo por semana hasta finalizar en la semana 9, a estas muestras se les realizo un procesamiento histológico y tinción con Hematoxilina y Eosina para realizar la medición de área y diámetro del túbulo seminífero, así como grosor del epitelio germinal y espacio intersticial entre cada túbulo. Se realizo una morfometría celular donde se contaron y compararon estadísticamente el número de células Leydig, Sertoli, espermatogonias, espermatocitos y espermátides elongadas, además de microscopia de fluorescencia para medir la intensidad de pixeles fluorescentes y se valore) el índice apoptótico (IA) con pruebas de inmunohistoquímica mediante el sistema de TUNEL. Se analizaron los resultados estadísticamente de manera independiente para conocer la relación que existe entre tratamientos con pruebas de Kruskal Wallis y Mann Whitney tomando como valor de significancia p<0.05, encontrando una disminución en el número total de espermatogonias, espermátidas elongadas y espermatocitos con un efecto mas agudo en el tratamiento de 1600 pg de mientras que con el tratamiento de 800 pg de COU se observó un efecto inicial mas lento. En ambos tratamientos los efectos fueron similares en lo referente a la cantidad de CL en cambio en las CS se observó un efecto mas agudo y sostenido en el tratamiento 800 pg de COU. Refiriéndose al epitelio germinal, diámetro y área de los túbulos seminíferos, en ambos tratamientos se presentó un aumento significativo, que a lo largo de las semanas fue disminuyendo, situación que coincide con la recuperación de las células germinales observadas al final del tratamiento. Ambos tratamientos provocaron daños en el tejido testicular de ratas macho Wistar al ser administrados vía subcutánea utilizando al quitosan como vehículo, lo que indica una distribución del fitoestrógeno en los tejidos reproductivos que ejerce deficiencias en la reproducción, de esta manera, utilizando un enfoque medico preventivo, en este proyecto se emplea un método innovador para alterar la fertilidad con agentes no letales (quitosan-coumestrol) que preservaran la salud y el bienestar animal contribuyendo a la disminución de la fauna nociva.