Determinación del perfil de metabolitos secundarios de un hongo endófito septado oscuro

Abstract

Dentro de la comunidad de microorganismos endófitos de raíz, se encuentran los hongos endófitos septados oscuros (ESO). Los hongos ESO mantienen una estrecha relación con su planta hospedera mediante la producción de metabolitos secundarios y la modificación de mecanismos de defensa vegetal. Lo anterior incide positivamente en la sobrevivencia de ambos organismos en condiciones de estrés ambiental, por ejemplo, en presencia de metales. Desde una perspectiva biotecnológica, los hongos ESO producen compuestos bioactivos útiles para la síntesis d e fármacos y agroquímicos. El objetivo de esta investigación fue identificar las modificaciones en el perfil de metabolitos secundarios de Alternaria alternata en presencia de Pb. A. alternata fue identificado molecularmente según la amplificación por PCR y secuenciación del segmento ITS. Se cultivó en papa-dextrosa-agar (PDA) y en medio modificado Melin-Norkrans adicionados con 400 mg/l de Pb, a 25°C, pH 6, durante siete días. La extracción de metabolitos se realizó mediante un proceso de maceración con acetato de etilo como disolvente; se analizó el perfil por cromatografía en capa fina y por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG-EM). En ambos medios de cultivo se detectaron cinco metabolitos con tiempos de retención (rt) de 5.83, 17.54, 22.59, 24.04 y 29.64 minutos, aunque varió su abundancia relativa en cada medio. Adicionalmente, se observó un metabolito con rt de 21.53 minutos sólo en PDA en presencia y en ausencia de Pb. La comparación de los espectros de masas de los diferentes metabolitos con los contenidos en la base de datos NIST2008 indicó una coincidencia del 97.1% del componente con rt de 22.59 minutos con el ftalato de bis (2-etilhexilo), el metabolito con mayor abundancia relativa, descrito previamente como antimicrobiano. En conclusión, el perfil metabólico de A. alternata varió entre medios de cultivo y la abundancia relativa fue modificada por el Pb. Por lo menos dos metabolitos constituyen un nuevo registro de metabolitos secundarios producidos por A. alternata.