Efectos de la quimioterapia en la expresión de HIFs en condiciones de Hipoxia

Abstract

The excessive growth of cancer cells causes the reduction of nutrients and oxygen concentrations inside the tumor niche. As a consequence, different signaling pathways are activated inducing the expression of hypoxia-induced factors (HIFs). In the present study, the expression of HIF1α, HIF2α and HIF3α has been evaluated under hypoxia and normoxia conditions at different times in A427 lung adenocarcinoma cells. A427 cells were cultured under normoxia (5% CO2) and 2 hypoxia (1%O2) conditions for 6, 12, 24 and 48 hours. Nuclear proteins were extracted, and Western blot and densitometric analysis were carried out to determine the protein expression of the three different HIFs. Under hypoxic conditions, HIF1α expression increased at 6 hours (p = 0.004), and 24 hours (p = 0.001), and it decreased at 48 hours. HIF2α expression decreased under hypoxic conditions at 6 hours (p= 0.001) and increased at 24 hours (p = 0.001). HIF3α expression was higher under hypoxic conditions at 6 hours (p = 0.001) and at 24 hours (p = 0.002). It was possible to determine that there is a major expression of these factors in hypoxia than normoxia conditions as a function of time.

El crecimiento desmedido de las células cancerígenas provoca la reducción de los nutrientes y de las concentraciones de oxígeno dentro del nicho tumoral. Como consecuencia se activan diferentes vías de señalización y así se promueve la expresión de factores inducidos por Hipoxia (HIFs). En el presente trabajo se ha evaluado, la expresión de HIF1α, HIF2α y HIF3α, en condiciones de Hipoxia y Normoxia a diferentes tiempos en células de adenocarcinoma pulmonar A427. Se cultivaron células A427 en condiciones de Normoxia (5% CO2) e Hipoxia (1% O2) por 6, 12, 24 y 48 horas. Se extrajeron proteínas nucleares, y por Western blot y análisis densitométricos, se determinó la expresión proteica de los tres diferentes HIFs. Se observó que en condiciones de Hipoxia HIF1α incrementó su expresión a las 6 horas (p = 0.004), y a 24 horas (p= 0.001), y disminuyó a las 48 horas. La expresión de HIF2α disminuyó en condiciones de Hipoxia a las 6 horas (p= 0.001) y aumentó a las 24 horas (p = 0.001). La expresión de HIF3α fue mayor en condiciones de Hipoxia a las 6 horas (p = 0.001) y a las 24 horas (p = 0.002). Se logró determinar que existe mayor expresión de estos factores en condiciones de Hipoxia a diferencia de las condiciones de Normoxia en función del tiempo.