Estimación del efecto del estrés por restricción de movimiento sobre los mucopolisacáridos intestinales en ratón BALB/c

Abstract

El mucus que recubre el colon es una barrera física con un papel relevante antinflamatorio, sin embargo, puede ser afectada por el estrés Justificación. Este protocolo podría ser un referente experimental para evaluar productos farmacéuticos con potencial terapéutico en enfermedades relacionadas con el estrés en donde el mucus intestinal se vea comprometido Objetivo. Estimar el efecto del estrés por restricción de movimiento sobre la concentración de mucopolisacáridos en colon Material y Métodos. Un lote de ratones BALB /c machos de 8 semanas de vida, se dividió en un grupo estresado n=6 y un grupo control n=6. Los ratones del grupo estresado por restricción de movimiento fueron introducidos en tubos cónicos de 50 mL horadados en periodos de 30 a 120 minutos, en horarios diferentes, por 8, 16 y 22 días consecutivos. Al terminar el periodo de estrés los ratones fueron sacrificados con isoflurano, se diseco el colon y se cortó longitudinalmente para almacenarlo en solución salina estéril. La muestra se tiño con azul alcian, se lavó con sacarosa y se extrajo el colorante con docusato al 70%. Se recolecto el sobrenadante de las muestras y se analizaron con un método espectrofotométrico por triplicado. La absorbancia de la muestra de leyó a una longitud de onda (λ) de 620 nm y la concentración de mucopolisacáridos, se estimó con base a la curva estándar de condroitin-4-sulfato y se expresó en μg /g de tejido. Los datos se analizaron con la prueba de Mann Whitney y las diferencias se consideraron significativos a valor de p<0.05 Resultados. En comparación con el grupo control, se observó una disminución estadísticamente significativa (p=0.0056) de mucopolisacáridos solo después de 16 días de estrés Conclusión. Se logró cuantificar la concentración de mucopolisacáridos en el colon, aunque es necesario pulir el modelo de restricción de movimiento a fin lograr su reproducibilidad.

The mucus that covers the colon is a physical barrier with a relevant anti-inflammatory role, however, it can be affected by stress Justification. This protocol may be an experimental reference to evaluate pharmaceutical products with therapeutic potential versus stress on the concentration of mucopolysaccharides in colon Objective. To estimate the effect of restraint stress on the concentration of colonic mucopolysaccharides Material and Methods. A batch of twelve 8-week-old male BALB/c mice were divided into a stressed group n=6 and a control group n=6. Mice from the stressed group were placed within 50 mL conical tubes with holes for 30 to 120 minutes, during 8, 16 and 22 consecutive days. At the end of the stress period, the mice were sacrificed with isoflurane, the colon was dissected and cut longitudinally. The sample was stained with alcian blue, washed with sucrose, and the dye was extracted with 70% docusate. The supernatant of the samples was collected and analyzed by triplicate. The absorbance of the sample was read at a wavelength (λ) of 620 nm and the concentration of mucopolysaccharides was estimated based on a standard curve of chondroitin 4-sulfate and expressed in μg of alcian blue/g of tissue. Data were analyzed with the Mann Whitney test and the differences were considered significant at a value of p<0.05 Results. Compared to the control group, a statistically significant (0=0.0056) decrease in mucopolysaccharides was observed only in the 16-day trial Conclusion. It was possible to quantify the concentration of mucopolysaccharides in the colon, although it is necessary to refine the movement restriction model in order to achieve its reproducibility.