Expresión heteróloga del gen de una vanadio haloperoxidasa (VHPO) hipotética de la especie de alga Fucus distichus

Abstract

En la actualidad, aproximadamente el 20 % de todos los productos farmacéuticos son halogenados. La halogenación es una estrategia eficaz utilizada para aumentar la actividad biológica de los metabolitos secundarios e involucra enzimas halogenantes diferentes. Las haloperoxidasas dependientes de vanadio (VHPO, por sus siglas en inglés) catalizan la oxidación de dos electrones de un haluro para generar los correspondientes ácidos hipohalosos. Estas enzimas están involucradas en la biosíntesis de compuestos orgánicos halogenados. Los estudios estructurales y cinéticos se han centrado en dos tipos de VHPO eucariotas: VCPO del hongo patógeno Curvularia inaequalis y VBPO de Ascophyllum nodosum . No obstante, el análisis de las secuencias eucariotas que se encuentran en la base de datos del Centro Nacional para la Información Biotecnológica, sugiere la presencia de una VHPO en el genoma de Fucus distichus (alga café), que comparte el 86% de identidad con la VHPO de A. nodosum. Esta última se distingue por su capacidad de halogenar moléculas orgánicas en medios no acuosos o con altos porcentajes de solventes. El presente trabajo de investigación se centra en explorar la expresión de la VHPO hipotética de Fucus distichus de manera heteróloga en Escherichia coli BL21 (DE3), modificando algunas de las variables (temperatura, rpm, concentración óptima de inducción de IPTG) que pueden ayudar a mejorarla expresión de proteínas recombinantes.