Estandarización de un protocolo de extracción de DNA para PINUS OOCAPA

Abstract

Las poblaciones cuentan con diversidad genética que permiten a los individuos resistir y tener habilidad para sobrevivir y perpetuar la especie en distintas circunstancias. Por ello, este trabajo se enfocó en el estudio genético de Pinus oocarpa, la especie más importante del ramo forestal del estado de Michoacán debido a su importancia económica para la producción de resina. La finalidad de estandarizar un protocolo de extracción de DNA para Pinus oocarpa no hay los estudios basados en la utilización de técnicas modernas para poder evaluar la diversidad genética y proponer un manejo forestal de dicha especie. Se utilizaron técnicas de espectrofotometría, electroforesis en geles de agarosa y marcadores moleculares para identificar el rendimiento, peso y pureza del ADN de P. oocarpa. Se logró extraer concentraciones de DNA de 258 a 811.6 ng μl-1 . Esto superó el objetivo que consistía de extraer al menos 100 ng ul-1, con un rango dela relación de absorbancia 280/260 de entre 1.86 y 1.92 lo que indica que hay una buena calidad y pureza de DNA. Para evaluar la existencia de micro satélites en esta especie, se probaron 3 pares de oligonucleótidos propuestos por Steinitz et al 2011 y Guevara et al., 2005, delos cuales solamente el par ITPH4516_R y ITPH4516_F amplificó para Pinus oocarpa, esto se comprobó por medio de PCR y electroforesis en geles de agarosa al 3%. Entre las perspectivas de este trabajo se encuentra el uso del protocolo de extracción de DNA establecido para probar distintos oligonucleótidos que amplifiquen microsatélites en esta especie y aplicarlo para un análisis diversidad genética