Prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para la identificación de Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm) en semillas de tomate (solanum lycopersicum) y chile (capsicum annuum L.)

Abstract

El cáncer bacteriano causado por Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis (Cmm) es una de las principales enfermedades de importancia económica del tomate (Solanum lycopersicum L.) y chile (Capsicum annuum L.) a nivel mundial. México ocupa la décima posición en la producción de estas hortalizas, no obstante, se ha visto afectada a causa de esta enfermedad. La bacteria Cmm puede ser identificada por métodos microbiológicos, bioquímicos y serológicos, sin embargo, estos métodos no han sido específicos como las pruebas moleculares. Por lo que el objetivo de ésta investigación consistió en estandarizar la Prueba de Reacción en Cadena de la Polimerasa en tiempo real para la identificación de Cmm en semillas de tomate y chile. Se reactivó la cepa pura de C.michiganensis subsp. Michiganensis, la cepa se ocupo para infectar artificialmente a las semillas, así mismo, las semillas infectadas se germinaron para adquirir síntomas en planta. Se realizaron pruebas de PCR utilizando primers específicos para Cmm, RZ_ptssk10 (sentido), RZ_ptssk11 (antisentido) y RZ_ptssk 12 (sonda). Se comprobó la presencia de Cmm por medio de la PCR tiempo real en el DNA de las semillas infectadas. La presencia de la bacteria en semillas de tomate (Solanum lycopersicum L.) y chile (Capsicum annuum L.) representa un riesgo económico que se debe identificar en tiempo y forma para controlar y evitar la diseminación de la misma.