Identificación molecular de hongos entomopatógenos mediante amplificación y secuenciación de los genes ribosomales y regiones ITS

Abstract

Los hongos entomopatógenos (HE) son aquellos que parasitan diferentes órdenes de insectos por lo que han tomado una gran importancia en el control biológico de plagas al ser un parasito de diferentes insectos que afectan la industria alimentaria y de importancia para el control biológico de las plagas evitando la contaminación por químicos o tóxicos que contienen los tratamientos con insecticidas (Rodríguez, et al, 2004) por lo que es de gran importancia su identificación y diferenciación entre las especies de HE. La identificación molecular de HE es importante ya que nos permite identificar especies con alto grado de certeza ya que se trata de diferencias en el material genético de cada hongo. Los genes ribosomales y las regiones ITS son las regiones del genoma ampliamente utilizadas para la identificación molecular ya que se trata de genes que presentan una alta tasa de polimorfismo lo que los hace muy variables entre especies además que estos genes se encuentran repetidos varias veces y en distintos lugares del genoma (cromosomas 13, 14,15,21 y 22) (Gómez, et al., 2012) lo que facilita su amplificación mediante PCR. En éste trabajo realizo la identificación molecular de HE mediante la amplificación por PCR de los genes ribosomales y las regiones ITS posteriormente la secuencia de ADN amplificada se mandó a secuenciar a la unidad de biología molecular (UNAM) para poder identificar la especie de HE buscando la identidad de la secuencia en la base de datos GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov), los resultaron indicaron que las tres cepas analizadas pertenecen a la especie B. bassiana y tienen una homología superior al 96% con secuencias del GenBank, finalmente se discuten los resultados obtenidos como la calidad del ADN genómico extraído de diferentes cepas de HE, y la homología de la secuencia de ADN con otras especies de HE.