Caracterización Molecular de Cepas Enterococcus faecium Aisladas de Pacientes Pediátricos Oncológicos

Abstract

Este estudio se enfocó en la caracterización molecular de cepas de Enterococcus faecium aisladas de pacientes pediátricos oncológicos en el Hospital Infantil de México Federico Gómez. Los enterococos son bacterias grampositivas que se encuentran comúnmente en la microbiota intestinal de humanos y animales, pero también son reconocidos como patógenos oportunistas. Pueden causar diversas infecciones, incluyendo endocarditis y sepsis, y su resistencia a múltiples antibióticos, como vancomicina, ha incrementado su relevancia en el contexto de las infecciones asociadas a la atención en salud (IAAS). El objetivo general del servicio social fue caracterizar molecularmente las cepas de E. faecium, mientras que los objetivos específicos incluyeron la extracción de ADN, la detección de genes de resistencia y virulencia mediante PCR, y la estandarización de la técnica de electroforesis en gel por campos pulsantes (PFGE). Se trabajaron un total de 32 cepas, que fueron cultivadas en medios adecuados y almacenadas a -70°C para su posterior análisis. La metodología empleada fue experimental y descriptiva. Se utilizó un kit comercial para la extracción de ADN de las cepas, seguido de reacciones en cadena de la polimerasa (PCR) para identificar genes específicos. Se detectaron genes de resistencia como vanA, pbp5, y aac-aph, así como genes de virulencia como acm y pilA. Los productos amplificados fueron analizados mediante electroforesis en gel. Los resultados mostraron que 28 de las 31 cepas analizadas presentaron una notable prevalencia del gen pbp5, seguido por aac-aph y acm. En cambio, los genes pilA y vanA se encontraron en menor proporción. Este hallazgo indica que E. faecium tiene una alta capacidad de resistencia a los tratamientos antimicrobianos, lo cual es alarmante, especialmente en un contexto hospitalario donde los pacientes son vulnerables. Durante los seis meses de servicio social, la alumna adquirió valiosos conocimientos y habilidades en microbiología y biología molecular. Se familiarizó con técnicas de laboratorio, el manejo de muestras y equipos, así como la importancia de seguir protocolos de seguridad y prevención. Este proceso no solo contribuyó a su formación académica, sino que también destacó la necesidad de un entrenamiento continuo en el campo de la salud, dado el crecimiento de la resistencia bacteriana. En conclusión, este trabajo subraya la importancia de la caracterización de cepas de E. faecium para entender mejor su virulencia y resistencia, lo que puede contribuir a estrategias efectivas de control y tratamiento en un contexto clínico.

This study focused on the molecular characterization of Enterococcus faecium strains isolated from pediatric oncology patients at the Hospital Infantil de México, “Federico Gómez”. Enterococci are gram-positive bacteria commonly found in the intestinal microbiota of humans and animals, but are also recognized as opportunistic pathogens. They can cause a variety of infections, including endocarditis and sepsis, and their resistance to multiple antibiotics, such as vancomycin, has increased their relevance in the context of healthcare-associated infections (HAIs). The main objective of the social service was to molecularly characterize E. faecium strains, while specific objectives included DNA extraction, detection of resistance and virulence genes by PCR, and standardization of the pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) technique. A total of 31 strains were cultured on appropriate media and stored at -70°C for subsequent analysis. The methodology used was experimental and descriptive. A commercial kit was used to extract DNA from the strains, followed by polymerase chain reactions (PCR) to identify specific genes. Resistance genes such as vanA, pbp5, and aac-aph, as well as virulence genes such as acm and pilA were detected. The amplified products were analyzed by gel electrophoresis. The results showed that 28 of the 31 strains analyzed presented a remarkable prevalence of the pbp5 gene, followed by aac-aph and acm. In contrast, the pilA and vanA genes were found in lower proportion. This finding indicates that E. faecium has a high capacity for resistance to antimicrobial treatments, which is alarming, especially in a hospital setting where patients are vulnerable. During her six months of social service, the student acquired valuable knowledge and skills in microbiology and molecular biology. She became familiar with laboratory techniques, sample and equipment handling, as well as the importance of following safety and prevention protocols. This process not only contributed to her academic training, but also highlighted the need for continuous training in the health field, given the growth of bacterial resistance. In conclusion, this work underscores the importance of characterizing E. faecium strains to better understand their virulence and resistance, which can contribute to effective control and treatment strategies in a clinical setting.