Estrés oxidante en lesión traumática de médula espinal en ratas.

Abstract

El alumno tuvo una participación en un artículo de la mano de sus tutores y alumnos de posgrado con prácticas realizadas en el Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía Manuel Velasco Suárez. Este informe contiene los pormenores de la participación del alumno, no así de elementos del artículo en los que el alumno no tuvo una participación activa. En este proyecto, al alumno se le asignó la tarea de estandarizar un método analítico para censar Glutatión Reducido en muestras de médula espinal de ratas que recibieron una lesión traumática estandarizada, explicada más a fondo en el cuerpo del trabajo. Glutatión reducido es un analito que evidencia la oxidación que se lleva a cabo a nivel tisular, de tal modo que, su transformación en Glutatión oxidado, es a su vez evidencia de que hay procesos oxidativos teniendo lugar. Estandarizar un método analítico para determinar la concentración de glutatión reducido, y que a su vez no reaccione con el estado oxidado, da evidencia analítica de una disminución en la concentración de glutatión reducido y por lo tanto, es evidencia de que hay un proceso de estrés oxidativo llevándose a cabo. Para ello, se hizo una adaptación del método propuesto por los autores Hissin & Hilf, tal como se encuentra contenido en el trabajo, para: (1) realizar el análisis en médula espinal, (2) ajustar el tratamiento de la muestra para que coincida con los otros métodos analíticos que se aplicaron a la muestra dentro del artículo, y (3) censar la cantidad de glutatión reducido contenido en la muestra a través del contraste contra un estándar externo consistente en una curva de calibración de concentraciones conocidas de glutatión reducido. El método consiste en un análisis realizado en el espectrofotómetro de fluorescencia donde, tanto las muestras biológicas como los estándares externos, se les agregó el reactivo orto-ftalaldehído para obtener el aducto fluorescente. Finalmente se aplicó el método en el experimento in vivo que se realizó en los grupos control de lesión, momento en que los asesores utilizaron los resultados del alumno como parte de los criterios para decidir la lesión que se utilizaría desde entonces para evaluar los tratamientos. Así mismo, el método obtuvo resultados para contrastar contra los tratamientos evaluados en el artículo.