https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/123456789/24790 2026-05-29T22:59:56Z 2026-05-29T22:59:56Z Hernández Licea, Uriel https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/123456789/54837 2026-05-28T18:03:06Z 2026-01-01T00:00:00Z

Title: Detección y cuantificación mediante cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) de metabolitos de Metronidazol, obtenidos por técnicas electroquímicas. Authors: Hernández Licea, Uriel Abstract: ; El estudio del metabolismo de fármacos representa un pilar fundamental en la investigación farmacéutica, ya que permite comprender su comportamiento biológico, perfil de seguridad y posibles interacciones. Sin embargo, los métodos tradicionales basados en ensayos in vivo o sistemas biológicos in vitro presentan limitaciones significativas en términos de complejidad operativa, costos económicos y dificultad para aislar metabolitos específicos. En este contexto, el presente trabajo de titulación aborda una revisión bibliográfica exhaustiva sobre el uso de técnicas electroquímicas y cromatográficas como alternativa metodológica para el estudio de metabolitos, utilizando al Metronidazol como molécula modelo debido a su metabolismo ampliamente caracterizado en la literatura científica. Un aspecto crucial identificado en la revisión es que la generación electroquímica de metabolitos requiere un control preciso de diversos parámetros experimentales que influyen directamente en el rendimiento y la reproducibilidad de las reacciones. Entre estos parámetros se encuentran el potencial aplicado, el material del electrodo (carbono vítreo, BDD o platino), la composición de la solución electrolítica, el tiempo de electrólisis, el pH del medio y la temperatura de reacción. La optimización de estas variables permite simular de manera controlada las condiciones del metabolismo hepático, donde el electrodo funciona como un análogo del sitio activo de enzimas como el citocromo P450. Para aplicaciones que requieren máxima sensibilidad y selectividad, especialmente cuando se trabaja con matrices biológicas complejas como plasma, orina o tejidos, la revisión destaca la importancia del acoplamiento de la cromatografía líquida con espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS). Esta configuración analítica permite no solo cuantificar el fármaco y sus metabolitos a concentraciones traza (del orden de nanogramos por mililitro), sino también confirmar su identidad estructural mediante el monitoreo de transiciones iónicas específicas, como se reporta en estudios farmacocinéticos que emplean estándares internos isotópicos para garantizar la precisión de los resultados. La revisión también aborda las estrategias de preparación de muestras, particularmente la extracción en fase sólida (SPE), que resulta indispensable para eliminar interferencias de la matriz y concentrar los analitos antes del análisis cromatográfico. En este sentido, los estudios revisados reportan recuperaciones superiores al 80% para el Metronidazol y sus metabolitos principales, con efectos de matriz mínimos cuando se utilizan procedimientos optimizados. En cuanto a los métodos cromatográficos, la revisión evidencia que la elección del sistema de detección depende fundamentalmente de los objetivos del análisis y la complejidad de la muestra.

2026-01-01T00:00:00Z Santana Guzman, Aleysha Daniela https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/123456789/54831 2026-05-27T17:06:39Z 2026-01-01T00:00:00Z

Title: Secuenciación sanger de regiones genómicas metiladas con técnica de bisulfito en muestras de madres con diabetes gestacional Authors: Santana Guzman, Aleysha Daniela Abstract: El presente informe describe el desarrollo de un proyecto de investigación enfocado en el análisis de regiones genómicas metiladas en muestras de madres con diabetes gestacional (DG), utilizando técnicas de conversión con bisulfito, PCR y secuenciación de Sanger. La diabetes gestacional representa una de las alteraciones metabólicas más frecuentes durante el embarazo y constituye un importante problema de salud pública debido a sus repercusiones maternas y fetales, así como al incremento del riesgo de desarrollar diabetes tipo 2 en etapas posteriores. En este contexto, el estudio se centró en el análisis del gen SLC16A11, identificado como un factor de riesgo relevante para enfermedades metabólicas en población latinoamericana. El objetivo principal consistió en generar y secuenciar regiones genómicas metiladas mediante técnicas moleculares aplicadas a muestras de sangre periférica de mujeres con diagnóstico de diabetes gestacional. Para ello, se realizó la separación de células mononucleares mediante gradiente de densidad con Ficoll, seguida de la extracción de ADN genómico. Posteriormente, el ADN fue sometido a conversión con bisulfito, con la finalidad de diferenciar citosinas metiladas de no metiladas. Las muestras tratadas fueron sometidas a amplificación por PCR y análisis mediante electroforesis en gel de agarosa. Sin embargo, no se observó amplificación específica de las regiones de interés, por lo que tampoco fue posible obtener resultados de secuenciación de Sanger. A pesar de ello, la amplificación exitosa del gen constitutivo β-actina confirmó que el ADN genómico original se encontraba íntegro, sugiriendo que las dificultades observadas estuvieron relacionadas principalmente con la degradación y reducción de complejidad del ADN posterior al tratamiento con bisulfito. Los resultados permitieron identificar importantes limitaciones técnicas asociadas al análisis de metilación del ADN, particularmente en la eficiencia de amplificación y secuenciación. Asimismo, el estudio destacó la necesidad de optimizar variables experimentales como la concentración inicial de ADN, las condiciones de conversión con bisulfito y el diseño de primers específicos. Finalmente, este trabajo contribuye al fortalecimiento de metodologías de biología molecular aplicadas al estudio epigenético de enfermedades metabólicas y aporta bases para futuras investigaciones relacionadas con la diabetes gestacional.; This report describes the development of a research project focused on the analysis of methylated genomic regions in samples from mothers with gestational diabetes mellitus (GDM), using bisulfite conversion, PCR, and Sanger sequencing techniques. Gestational diabetes represents one of the most frequent metabolic disorders during pregnancy and constitutes an important public health issue due to its maternal and fetal repercussions, as well as the increased risk of developing type 2 diabetes later in life. In this context, the study focused on the analysis of the SLC16A11 gene, identified as a relevant risk factor for metabolic diseases in the Latin American population. The main objective was to generate and sequence methylated genomic regions through molecular techniques applied to peripheral blood samples from women diagnosed with gestational diabetes. For this purpose, mononuclear cells were separated using a Ficoll density gradient, followed by genomic DNA extraction. Subsequently, the DNA was subjected to bisulfite conversion in order to differentiate methylated from unmethylated cytosines. The treated samples underwent PCR amplification and agarose gel electrophoresis analysis. However, no specific amplification of the regions of interest was observed, and therefore it was not possible to obtain Sanger sequencing results. Despite this, the successful amplification of the constitutive β-actin gene confirmed that the original genomic DNA remained intact, suggesting that the observed difficulties were mainly related to DNA degradation and reduced complexity after bisulfite treatment. The results made it possible to identify important technical limitations associated with DNA methylation analysis, particularly regarding amplification and sequencing efficiency. Likewise, the study highlighted the need to optimize experimental variables such as the initial DNA concentration, bisulfite conversion conditions, and the design of specific primers. Finally, this work contributes to strengthening molecular biology methodologies applied to the epigenetic study of metabolic diseases and provides a basis for future research related to gestational diabetes.

2026-01-01T00:00:00Z Álvarez Aguilar, Armando https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/123456789/54812 2026-05-26T19:40:25Z 2025-01-01T00:00:00Z

Title: Síntesis de redes metal-orgánicas basadas en la porfirina TpVaiP y aluminio como material templante. Authors: Álvarez Aguilar, Armando Abstract: In this work, the synthesis and characterization of the porphyrin 5,10,15,20-tetrakis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)porphyrin (TpVaiPP), obtained via a condensation reaction between pyrrole and vanillin, was carried out. The aim was to use it as a ligand in the preparation of an aluminum-coordinated hybrid material (TpVaiPAl) with characteristics associated with metal-organic framework (MOF) structures. The ligand was characterized by UV-Vis, FTIR, HRMN, and powder X-ray diffraction (XRD). The UV-Vis spectrum showed the Soret band and the characteristic Q bands of porphyrins, confirming the formation of the macrocycle. The FTIR and HRMN analyses allowed the identification of the functional groups and the proton signals corresponding to the macrocycle. The XRD pattern revealed the structural organization of the solid and the presence of intermolecular interactions characteristic of this type of compound. Subsequently, the TpVaiPAl material was synthesized through the interaction of porphyrin with aluminum, and its preliminary XRD characterization showed changes in the diffraction pattern compared to the free ligand, suggesting structural modifications associated with the incorporation of the metal. However, complete spectroscopic characterization of the coordinated material could not be performed due to a lack of access to certain analytical equipment during the project. Despite this limitation, the results obtained confirm the synthesis of the porphyrin ligand and establish a basis for future studies focused on the characterization and evaluation of porphyrin materials coordinated with metals.; En el presente trabajo se llevó a cabo la síntesis y caracterización de la porfirina 5,10,15,20 tetrakis(4hidroxi-3-metoxifenil)porfirina. (TpVaiPP), obtenida mediante una reacción condensación entre pirrol y vainillina, con el objetivo de emplearla como ligando en la preparación de un material híbrido coordinado con aluminio (TpVaiPAl) con características asociadas a estructuras tipo red metalorganica (MOF por sus siglas en ingles metal-organic framework (MOF)). La caracterización del ligando se realizó mediante espectroscopía UV-Visible, FTIR, HRMN y difracción de rayos X de polvos (DRX). El espectro UV-Visible mostró la banda de Soret y las bandas Q características de las porfirinas, confirmando la formación del macrociclo. Los análisis FTIR y HRMN permitieron identificar los grupos funcionales y las señales protónicas correspondientes al macrociclo. Por su parte, el patrón de DRX evidenció la organización estructural del sólido y la presencia de interacciones intermoleculares propias de este tipo de compuestos. de Posteriormente, se realizó la síntesis del material TpVaiPAl mediante la interacción de la porfirina con aluminio, y su caracterización preliminar por DRX mostró cambios en el patrón de difracción respecto al ligando libre, lo que sugiere modificaciones estructurales asociadas a la incorporación del metal. No obstante, la caracterización espectroscópica completa del material coordinado no pudo realizarse debido a la falta de acceso a ciertos equipos analíticos durante el desarrollo del proyecto. A pesar de esta limitación, los resultados obtenidos confirman la síntesis del ligando porfirínico y establecen una base para futuros estudios orientados a la caracterización y evaluación de materiales porfirínicos coordinados con metales.

2025-01-01T00:00:00Z Guerra Hernández, Abraham Alí https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/handle/123456789/54803 2026-05-26T19:40:19Z 2025-01-01T00:00:00Z

Title: Determinación del logP por cromatografía de líquidos de alta resolución en fase reversa en un grupo de moléculas con características afines Authors: Guerra Hernández, Abraham Alí Abstract: This study applied a method for estimating the partition coefficient (logP) through reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) using the logKw parameter as a chromatographic descriptor. Several molecules with related structural characteristics were analyzed, including xanthines and analgesic-antipyretic compounds, using acetonitrile and methanol as organic modifiers at different proportions. Methodology: Based on the retention times obtained in a reverse-phase chromatographic system with end-capping and varying proportions of organic modifier, retention factors were calculated and the linear relationship between the logarithm of these factors and the volumetric fraction of the organic modifier was established, allowing the extrapolation of logKw values for each of the tested compounds. Results: The results showed that the correlation with logKw depends on the structural similarity of the compounds included in the analysis, with better consistency observed when chemically similar groups were analyzed independently rather than combining all data together. Likewise, the use of acetonitrile showed greater agreement with the logP ranges reported in the literature. Conclusions: It is concluded that RP-HPLC constitutes a useful tool and a viable alternative for the preliminary estimation of lipophilicity, provided that the system’s linearity conditions are considered. Furthermore, for the successful application of this approach, it is highly important to classify and analyze molecules according to related physicochemical characteristics, allowing for a reasonable prediction range based on chromatographic behavior and similar properties.; En este trabajo se aplicó un método para la estimación del coeficiente de partición (logP) mediante cromatografía de líquidos de alta resolución en fase reversa (RP- HPLC) utilizando el parámetro logKw como descriptor cromatográfico. Se analizaron diversas moléculas con características estructurales afines, incluyendo xantinas y analgésicos-antipiréticos, empleando acetonitrilo y metanol como modificadores orgánicos de diferentes proporciones. Metodología. A partir de los tiempos de retención obtenidos en un sistema cromatográfico de fase reversa con end caping y variando las proporciones de modificador orgánico se calcularon los factores de retención y se estableció la relación lineal entre el logaritmo de dichos factores y la fracción volumétrica del modificador orgánico, permitiendo la extrapolación del logKw para cada uno de los compuestos ensayados. Resultados. Los resultados mostraron que la correlación entre logKw depende de la similitud estructural de los compuestos incluidos en el análisis, observándose una mejor consistencia al analizar grupos químicos semejantes de manera independiente con respecto a la combinación de todos los datos. Asimismo, se identificó que el uso de acetonitrilo proporcionó una mayor concordancia con los intervalos de logP reportados en la literatura. Conclusiones. Se concluye que la RP-HPLC constituye una herramienta útil y una alternativa viable para la estimación preliminar de la lipofilicidad, siempre y cuando se consideren las condiciones de linealidad del sistema. Asimismo, es de gran importancia, para el éxito de la herramienta, el manejo de moléculas por grupos clasificados de acuerdo a características fisicoquímicas afines, que den lugar a un margen razonable de predicción en función a comportamientos cromatográficos en función a propiedades semejantes.

2025-01-01T00:00:00Z